人类免疫缺陷病毒抗体筛查检测规范与质量控制专家共识

0 引言

获得性免疫缺陷综合征(AIDS)简称艾滋病，是由 HIV感染引起的，以人体CD4+T淋巴细胞减少为特征的进行性免疫功能缺陷，疾病后期可继发各种机会性感染、恶性肿瘤和中枢神经系统病变的综合性疾患。根据2025年的最新共识解读，截至2023年底，全国现存 HIV/AIDS患者约为129万例，新报告感染者中性传播比例超过95%，尚有约18%的感染者未被发现 $^{[1]}$ 。早发现、早诊断、早治疗对控制疫情扩散、减少病死率具有关键意义，精准病毒抗体检测是重要技术手段 $^{[2]}$ 。《全国艾滋病检测技术规范》 $^{[3]}$ 要求建立标准化检测技术平台和质控体系。目前检测技术存在标准化程度不高、操作规范差异大、试剂性能参差不齐、质控体系不完善、人员技能差异大等问题 $^{[4]}$ 。本研究采用文献综述、理论研究方法，形成 HIV抗体筛查检测技术规范和质量控制专家共识，构建以ELISA法、化学发光免疫分析法、Western blot抗体确证试验为核心的标准化检测体系和基于 Levey-Jennings质控图的6条经典质控规则，提高检测准确性和标准化水平。

1 艾滋病检测技术规范

1.1 实验室管理规范

<BeginOfPara>实验室质量管理包含八大核心要素:人员、环境设施、设

<EndOfPara>备、试剂与耗材、检测方法、质量保证、信息系统、文件控制。

人员管理要求检测人员具有相关教育和专业资质并从事检验工作2年以上，技术负责人需中级以上职称并从事相关工作5年以上，每年培训不少于40学时。

环境设施管理要求实验室严格分区，核酸检测实验室采用四区布局，BSL-2实验室用于未经培养的感染性材料的操作，BSL-3实验室用于病毒分离与扩增。

设备管理要求配备与检测项目相匹配的仪器设备，安装时需进行验收确认，定期进行维护、检定或校准。

试剂与耗材管理要求选择有证试剂，对采购试剂进行外观及技术验收，进行验收、储存、使用全过程管理。

检测方法管理要求选择经药监局批准试剂，建立标准操作程序并进行方法学验证。

质量保证管理要求建立质量保证体系，建立室内质控、室间质评、能力验证等制度。

信息系统管理要求建立LIMS系统、实验室信息管理系统等信息管理体系，实现样本全流程信息化管理。

实验室认可管理按照CNAS认可准则要求 $^{[5]}$ ,建立质量管理体系和技术管理体系。

1.2 检测技术规范

快速检测、ELISA检测技术、化学发光免疫分析法和

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Westernblot抗体确证检测技术是实验室常用检测技术,对结果准确性和可比性具有重要意义。

第四代ELISA技术同时检测HIV-1/2抗体和p24抗原，敏感度≥99.5%,特异度≥99.8%,窗口期缩短至18~25天。操作控制点包括试剂平衡、加样精度、孵育条件、洗板质量。质控要求每批设置三水平对照。

化学发光免疫分析法敏感度≥99.5%,特异度≥99.8%,检测速度为120~600测试/小时,批内CV值≤5%、批间CV值≤10%。仪器校准包括每日开机光信号校准、新批号试剂使用前校准、每批双水平质控品质控监测。

快速检测技术适用于现场、急诊、偏远地区筛查，敏感性≥99.0%,特异性≥99.5%。样本类型包括全血、血清、血浆,阳性结果必须确证实验室确证。

Western blot确证检测技术判定标准采用 WHO标准[5]:阳性为至少出现 2条包膜蛋白条带(gp41、gp120/gp160),阴性为无任何条带或仅有 gag、pol条带，不确定情况需追踪检测。

1.3 样本与生物安全规范

样本采集标准要求使用一次性真空采血管含分离胶促凝管,采血量成人5~10mL、儿童2~5mL ${}^{[6]}$ ,采血部位选择肘前静脉避免溶血,样本标识采用唯一性标识码。样本运输保存要求2~8℃冷链运输,三层包装符合生物安全要求,常温4h内送达,冷藏24h内检测,血清分离后2~8℃保存7d,-80℃长期保存。

样本接收处理需核对信息完整性，检查样本状态，拒收溶血、脂血、凝固样本。前处理离心条件3000r/min,10min,分离血清避免细胞污染。

生物安全管理中，HIV属危害程度二类病毒，传播途径包括血液、性接触、母婴传播、职业暴露，56℃30min可灭活。个人防护要求BSL-2需工作服、手套、帽子、口罩，BSL-3需双层防护服、双层手套、N95口罩，防护用品污染后立即更换。

2 质量控制体系构建

2.1 室内质量控制准则

室内质量控制通过系统性质控体系确保检测结果准确性和可靠性。

定量检测采用6条经典质控规则:12S规则(一个结果超过x±2S为警告)、13S规则(一个结果超过x±3S为失控)、22S规则(两个结果同时超过同侧2S提示系统误差)、R4S规则(两个结果差值超过4S提示随机误差)、41S规则(连续4次结果同侧超过1S提示系统误差)、10X规则(连续10个结果在均值一侧提示系统误差)。

定性检测质控要求设置弱性质控品(Cut-off值2~3倍)和阴性质控品，每批检测至少1次。

<BeginOfPara>核酸检测质控:HIV-1 RNA使用5000~15000拷贝/mL

<EndOfPara>质控品，HIV-1DNA包括1个阴性+2个阳性质控品，POCT使用弱阳性+阴性质控品。基因型耐药检测采用双人判读，Bootstrap值≥99%需流行病学调查。CD4 ${}^{+}$ T淋巴细胞计数采用13S和22S失控判断标准 ${}^{[8]}$ 。

质控品制备要求56℃热灭活30min,倍比稀释至目标浓度，-20℃保存。

2.2 室间质量评价体系

室间质量评价按照WS/T 644-2018标准 ${}^{[9]}$ 要求，质评样品制备要求均一性标准差≤检测方法标准差10%，稳定性要求检测值变化≤10%，安全性处理包括56℃热灭活、0.22μm过滤除菌。样品组成涵盖不同抗体水平(高、中、低、阴性)，包含HIV-1和HIV-2型，临界样本接近Cut-off值。

统计分析中,定性结果正确率计算为(正确结果数/总结果数) $\times 100\%$ ,定量结果 SDI计算为(实验室结果-组均值)/组标准差。评价标准为|SDI|<2结果满意, $2\leqslant|SDI|<3$ 结果可疑,|SDI|≥3离群结果需纠正。

不合格处理机制原因分析包括检测前因素(样本储存、设备校准、试剂验证)、检测中因素(操作失误、系统问题、环境条件)、检测后因素(结果录入、质控程序)、管理因素(人员培训、程序执行)。纠正措施要求立即调查原因，制定纠正措施，评估样本结果可靠性，必要时暂停检测重新校准。

2.3 职业暴露与应急处置

职业暴露类型包括皮肤暴露(完整皮肤接触感染性材料)、黏膜暴露(眼、口、鼻黏膜接触)、经皮暴露(针刺伤、刀割伤等)。应急处理流程要求立即清洗暴露部位，挤压伤口排血，用75%酒精或碘伏消毒，1h内报告相关部门，2h内开始预防性用药，定期跟踪检测抗体转化情况。

失控类型分为随机误差(控制在允许范围)、系统误差(及时发现并校正)、过失误差(尽量消灭)。失控原因分析流程从易到难、由近到远初步查找，操作复查检查步骤、试剂、温度、仪器等,数据分析包括原始数据分析和质控图分析。

3 实施策略与持续改进

检测前质量控制包括样本质量控制(标准化采集、冷链保证、完整性检查、正确保存)和试剂耗材管理(技术验收、环境控制、性能验证)。

检测中质量控制要求严格执行标准作业程序,监控关键参数,质控品每批必测,环境条件实时记录。设备性能监控包括每日检查校准状态,定期维护验证。

检测后质量控制建立结果审核机制:系统自动审核、技术人员人工审核、质量负责人质量审核、疑难专家咨询。报告质量管理要求统一模板、及时发布、多重审核、完整记录。

持续改进机制按GB/T27025-2019标准 ${}^{[10]}$ 建立质量监控体系，设定准确性、精密性、及时性指标及客户满意度。通

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过定期质量会议进行数据分析，制订改进措施 $^{[11]}$ 。能力建设包括人员培训、能力评估、继续教育、及方法学研究、质量提升、标准化建设。实验室按ISO 15189标准 $^{[12]}$ 建立质量管理体系。检测方法验证按分子诊断指南 $^{[13]}$ 确保准确性。

4 结论与展望

4.1核心成果总结

本专家共识建立了与国家标准接轨的完整技术体系。技术规范方面，建立了涵盖了人员、环境、设备、试剂、方法、质量保证、信息系统、文件控制的全面管理体系。ELISA、化学发光、快速检测和Western blot等主流检测技术标准化操作规程，确保检测结果准确性和可比性。

质量控制方面，室内质量控制采用6条经典质控规则和Levey-Jennings质控图法，实现检测过程实时监控;室间质量评价通过标准化样品和统计学评价体系，保证不同实验室间结果一致性。生物安全管理体系有效防范职业暴露风险，保障人员和环境安全。

4.2 实施价值与意义

本专家共识实施将显著提升我国HIV抗体检测整体水平。与现行技术规范全面接轨，减少实验室间差异，提高检测结果可比性和准确性，降低假阳性假阴性发生率。完善质量控制体系及时发现纠正检测误差，保障检测质量稳定。有助于更早发现 HIV感染者，及时开展治疗预防措施，减少疫情传播风险，为血液安全筛查、临床诊疗和疫情监测提供可靠技术支持。标准化检测技术推广应用，将提升我国艾滋病防控工作科学化水平，与国际先进水平接轨。

4.3 可能存在的问题

本专家共识虽构建较为完备的技术规范及质量控制体系，但实际应用仍存在问题在存在问题。

其一,共识覆盖面难以百分之百,特殊检测场景存在技术局限性。急诊科或偏远地区医疗机构受条件限制,无法完全按BSL-2标准布置实验室;特殊人群检测需要更敏感手段，超出常规技术规范范畴。

其二,执行难度大,不同级别医疗机构在人员、设备、技术水平方面差别较大,基层实验室面临人员培训不足、质控品配备困难等问题。

其三,新兴检测技术如数字PCR、基因测序发展迅速,现存规范可能落后于技术发展。

因此需制定不同执行策略，建立分级管理机制，加强技术培训和质量监督，确保共识真正落地。

4.4发展前景与展望

随着分子生物学和自动化技术发展，HIV抗体检测将向更精确、快捷、便利方向发展。新一代检测技术将缩短口期，提高敏感度和特异度，支持早期诊断。核酸检测技术普及

<EndOfPara>将实现抗体与核酸检测有机结合，形成完善体系。质量控制体系将依托信息化、智能化技术实现精细管理,实时监控预警提升管理效率。人工智能在结果判读、质量分析、风险预警等方面应用,推动质量控制智能化。国际合作交流促进检测技术标准国际化接轨。面向未来,需持续关注技术趋势,及时更新技术规范和质控标准，确保专家共识适应防控需求。

参考文献

[1]中国疾病预防控制中心.2023年全国艾滋病性病丙肝防治工作进展报告[R].北京:中国疾病预防控制中心,2024.

[2]韩孟杰,金聪,李敏云,等.扩大艾滋病检测促进早检测专家共识[J].中国艾滋病性病,2021,27(11):1202-1206.

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[4]邢文革,肖瑶,潘品良,等.以防治工作需求为导向全面建成艾滋病检测技术平台及标准化质控体系[J].中国艾滋病病,2019,25(10):993-996.

[5]中国合格评定国家认可委员会.医学实验室质量和能力认可准则:CNAS-CL02/ISO 15189-2022[EB/OL].[2025-09-12]. https://www.cnas.org.cn/cms_filemanager/328304128/attach/202412/DE06AE9E831278695213E0EE4BF1AFBB.pdf.

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[6]世界卫生组织.HIV检测策略和算法建议[R].日内瓦:WHO出版社，2019.

[7]国家标准化管理委员会.人类血液样本采集与处理:GB/T 38576-2020[EB/OL].[2025-09-12].http://c,bg688.cn/bzg/gb/showGb?type=online\&.hcno=A5101C03AE8FE257D905CFF84EC9549E.

[8]中华人民共和国国家卫生健康委员会.流式细胞术检测外周淋巴细胞亚群指南:WS/T 360-2024[EB/OL].[2025-09-12].https://www.nhc.gov.cn/wjw/s9492/202404/1b27277ffed824059ae0493cb0ef5449b/files/1739781663982_48885.pdf.

[9]中华人民共和国国家卫生健康委员会.临床检验室间质量评价:WS/T 644-2018[EB/OL].[2025-09-12].https://www.nhc.gov.cn/wjw/s9492/201812/6e52feda83c5451487b191e2f52d87c73/files/1739781513322_66745.pdf.

[10]国家市场监督管理总局.检测和校准实验室能力的通用要求:GB/T 27025-2019/ISO17025[EB/OL].[2025-09-12].https://openstd. samr. gov. cn/bzg/gb/newGbInfo? hno=4B62BB2C0A67DCEAEB975CF9A012FCA49.

[11]中国合格评定国家认可委员会.分子诊断检验程序性能验证指南:CNAS-GL039[EB/OL].[2025-09-12].https://www.cnas.org.cn/rkgf/sysrk/rkzn/art/2024/art_53d915df 30da4554a7fa7bd4931a3adf.html.

[12]何云. HIV急性感染期诊疗管理专家共识[J].中国艾滋病性病,2022,28(6):730-734.